线粒体基因异质性突变的检测技巧

• 作者: 于德民 刘德敏 李明珍
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: DNA,线粒体 遗传异质性 糖尿病 聚合酶链反应 多态性,限制性片段长度
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 396-398
• 页数: 3页
• 分类号: R4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2006.06.013

摘要

目的:探讨提高线粒体基因异质性突变tRNAleu(UUR)3 243A→G检出率的方法.方法:采用经测序证实的纯合突变菌株质粒DNA配制不同比例的模板,以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析检测灵敏度.结果:常规琼脂糖凝胶电泳对3 243A→G突变检测的灵敏度为12%的异质比例,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测灵敏度为8%的异质比例,扩大酶切体系可使前者提高到2%的异质比例.结论:增加PCR产物比例,扩大酶切体系,可提高线粒体基因异质性突变的检出率,尽量减少假阴性结果,可应用于临床检测.