结核分支杆菌Mtb8.4真核、原核表达质粒的构建与表达

• 作者: 朱玉贤 李博 杨宏倩 蔡宏
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 结核病 Mtb8.4重组原核表达载体 核酸疫苗
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 54-57
• 页数: 4页
• 分类号: S852.618|Q786
• 字数: 3253字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2006.01.015

摘要

低分子质量蛋白抗原Mtb8.4是一种非常重要的结核分支杆菌抗原,为了研制结核病核酸疫苗和进行结核病的诊断,分别将其构建到原核和真核载体中进行表达.以结核分支杆菌标准菌株H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增目的基因Mtb8.4,扩增产物酶切后分别克隆到真核表达载体pJW4303和原核表达载体pGEX-4T-1中,构成重组真核表达载体pJW-Mtb8.4和重组原核表达载体pGEX-Mtb8.4,用限制性内切酶消化,PCR扩增及DNA序列分析等多种方法鉴定;并将正确构建的原核表达载体转入E.coli BL21(DE3)plysS中,IPTG诱导表达.结果表明,重组真核表达载体pJW-Mtb8.4和重组原核表达载体pGEX-Mtb8.4构建成功.构建的真核重组质粒pJW-Mtb8.4即可作为结核病DNA疫苗.原核表达载体pGEX-Mtb8.4在BL21(DE3)plysS中成功表达,将表达蛋白进行纯化,作为保护性结核分支杆菌抗原以便检测DNA疫苗的免疫效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李博	北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室	24	503	8.0	22.0
2	朱玉贤	北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室	53	478	14.0	19.0
3	蔡宏	北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室	49	262	9.0	13.0
4	杨宏倩	北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室	1	3	1.0	1.0