草鱼TRAP-PCR反应体系的建立

• 作者: 张志伟 曹哲明 韩曜平
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 草鱼 TRAP 反应体系 遗传多样性
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 31-34
• 页数: 4页
• 分类号: Q953+.3|Q812
• 字数: 4229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2006.02.012

摘要

目的:通过优化草鱼TRAP-PCR反应体系,将新型分子标记-靶位区域扩增多态性(target region amplified polymorphism,TRAP)引用到草鱼遗传多样性研究中.方法:以草鱼DNA为材料,分析了模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物浓度,以及循环参数、退火温度对TRAP-PCR扩增结果的影响.结果:确立了稳定性强、重复性好的草鱼TRAP-PCR最佳反应体系和扩增参数:在25μl的PCR反应体系中,含约50ng模板DNA,1U Taq酶,1×PCR缓冲液,2.0mmol/L MgCl2,4种dNTPs各0.2mmol/L,固定引物与随机引物各15pmol;首先使模板在94℃变性3min;然后94℃变性1min,38℃退火1min,72℃延伸1min进行5个循环;接着94℃变性45s,55℃退火45s,72℃延伸1min再进行35个循环,最后72℃延伸7min.结论:TRAP-PCR反应体系稳定可靠,该新型分子标记可应用于草鱼遗传多样性研究中.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹哲明	中国水产科学院淡水渔业研究中心	23	427	9.0	20.0
2	张志伟	南京农业大学无锡渔业学院	6	207	5.0	6.0
3	韩曜平	南京农业大学无锡渔业学院	3	119	2.0	3.0