反义HPV16 E6/E7-EGFP重组质粒的构建及其对宫颈癌SiHa细胞的促凋亡作用

• 作者: 卢运萍 司马妮 孔德波 王世宣 王娟 王薇 罗爱月 马丁
• 来源期刊: 现代妇产科进展
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头状瘤病毒16型 E6/E7癌基因 细胞凋亡 宫颈肿瘤
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 894-897,插页1
• 页数: 5页
• 分类号: R737.33
• 字数: 3628字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-7379.2006.12.002

摘要

目的:构建HPV16早期基因E6/E7的反义重组质粒,探讨其对SiHa细胞的促凋亡作用.方法:将HPV16 E6/E7基因片段反向克隆于真核表达载体pEGFP-C1并转染SiHa细胞,用RT-PCR方法检测转染后SiHa细胞E6、E7基因mRNA的表达,Western blot方法检测转染后E6/E7蛋白的表达,流式细胞仪检测转染后细胞的凋亡率.结果:成功构建携带HPV16 E6/E7基因反义片段的真核表达载体,转染该质粒后,SiHa细胞E6、E7基因的mRNA和蛋白均明显下调;转染后细胞凋亡率为(59.3±11.3)%,明显高于转染空载体组[(9.4±1.8)%]和未转染组[(2.1±0.4)%](P＜0.05).结论:反义HPV16 E6/E7基因可下调宫颈癌细胞中E6/E7癌基因的表达,诱导宫颈癌细胞凋亡,为宫颈癌的基因治疗提供了实验依据.