人视网膜母细胞瘤肿瘤干细胞的分离培养

• 作者: 伍忠銮 刘敬波 彭福华 李永平 杜建阳 林建贤 葛坚 钟秀风 黄冰
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜母细胞瘤 肿瘤干细胞
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1177-1181
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 4225字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2006.06.032

摘要

目的:体外分离培养人视网膜母细胞瘤肿瘤干细胞(RTSC),建立RTSC的鉴定方法.方法:新鲜Rb组织经酶消化法获取单个瘤细胞,接种于无血清化学限定培养基培养.对培养7-15 d的神经样球体,分别进行克隆形成、增殖能力、分化能力等干细胞特性鉴定;采用RT-PCR及免疫荧光等方法对RTSC及其分化细胞的特性进行鉴定.结果:Rb肿瘤在无血清培养基中可以形成神经球体样肿瘤球体,后者可以多次传代,具有自我再续能力.RTSC来源的神经球体表达神经干细胞或视网膜早期发育的相关基因Nestin、CD133、Bmi-1、Pax6、RX及Chx10.在分化培养基上,肿瘤球体内细胞可以向神经元和胶质细胞分化,形成神经网络样结构,该分化细胞部分表达GFAP、MAP2、GAP43、PKC-a、Syntaxin及Recoverin等.RTSC分化后的神经样细胞为谷氨酸能神经元细胞.结论:本结果揭示Rb中存在具有自我增殖及分化能力的视网膜前体细胞样的肿瘤干细胞.此类细胞可能是Rb恶性增殖的根源,也将成为Rb治疗的新靶点.