免疫荧光技术中不同固定剂对RhoA蛋白定位的影响

• 作者: 秦犹 陈永昌
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 固定剂 免疫荧光显微镜术 TritonX-100 RhoA
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 385-388
• 页数: 4页
• 分类号: R735
• 字数: 2340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2006.05.004

摘要

目的: 观察免疫荧光技术中不同固定剂对SGC7901细胞中RhoA蛋白定位的影响,找出最适合观察RhoA蛋白细胞内定位的固定方法. 方法: 采用免疫荧光的方法观察在使用不同固定剂(2%多聚甲醛,4%甲醛,甲醇,丙酮,10%三氯醋酸)及0.3%TritonX-100穿孔的条件下,RhoA蛋白在SGC7901细胞中的定位.结果: 用2%多聚甲醛固定,不用0.3%TritonX-100时,染色显示胞质内可见少量RhoA蛋白散在分布,核内则有RhoA蛋白浓聚;用0.3%TritonX-100后,质内只能见极少量阳性染色,核内蛋白染色变得清晰.甲醛固定后染色显示RhoA蛋白主要在核内分布,使用TritonX-100后染色更为清楚.甲醇和丙酮固定后染色显示RhoA蛋白主要在胞质内分布,核内基本未见阳性分布,加TritonX-100后核内染色增强,胞质染色减弱.另外,使用10%三氯醋酸固定未加TritonX-100时染色较淡,胞质胞核都可见,加TritonX-100后核内可见蛋白浓聚,胞质染色减少.结论: 用免疫荧光法观察RhoA定位时,固定剂的不同以及是否加TritonX-100对观察RhoA蛋白细胞内定位具有较大的影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈永昌	江苏大学医学院	59	228	8.0	11.0
2	秦犹	江苏大学医学院	4	11	2.0	3.0