人羊膜来源间质干细胞的分离、培养及鉴定

• 作者: 关方霞 宋来君 张清勇 徐虹 李国喜 杜英 杨波 胡平生 胡祥
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 羊膜 间质干细胞 培养 神经元样细胞
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 系列研究Ⅱ
• 页码范围: 244-247
• 页数: 4页
• 分类号: R322.81
• 字数: 2767字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2006.02.017

摘要

目的:探讨来源于人羊膜间质干细胞(amniotic-derived mesenchymal stem cells,AD-MSCs)的分离、培养及鉴定.方法:无菌条件下取正常足月剖腹产胎儿的羊膜剪成碎片,加入胰酶37℃消化30 min,共2次,然后加入终浓度1.0 g/L的胶原酶和0.1g/L的DNA酶,37℃消化60 min,收集细胞,用含体积分数为10%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12培养基进行培养和纯化.倒置显微镜观察细胞形态,取4～6代的细胞用流式细胞仪分析细胞表面标志,取扩增第3代后的AD-MSCs加入全反式维甲酸(RTRA)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)向神经元样细胞诱导分化.结果:来源于羊膜的细胞种植于DMEM/F12培养基中后,可在体外大量扩增并纯化;流式细胞检测显示:CD29、CD44、HLA-ABC阳性表达,CD34、CD45、HLA-DR阴性表达.免疫细胞化学显示AD-MSCs经RTRA和bFGF诱导后表达神经元特异性烯醇化酶,不表达胶质纤维性蛋白.结论:羊膜中存在间质干细胞,其可以在体外培养、扩增、纯化,并可在体外向神经元样细胞分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张清勇	郑州大学第二附属医院胸外科	80	303	8.0	12.0
2	杨波	郑州大学第一附属医院神经外科	173	677	13.0	17.0
3	胡祥		42	217	8.0	12.0
4	宋来君	郑州大学第一附属医院神经外科	244	945	14.0	20.0
5	杜英	郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室	115	406	10.0	13.0
6	关方霞		64	248	9.0	12.0
7	李国喜		1	25	1.0	1.0