意大利蜜蜂蜂毒磷脂酶A2基因在杆状病毒-昆虫细胞系统中的表达

• 作者: 张传溪 沈立荣 程家安 邢丽苹
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 意大利蜜蜂 蜂毒 磷脂酶A2基因 杆状病毒-昆虫细胞系统 表达
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 367-372
• 页数: 6页
• 分类号: Q966
• 字数: 5983字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0454-6296.2006.03.003

摘要

利用Bac to Bac系统将意大利蜜蜂蜂毒磷脂酶A2(AmPLA2)基因cDNA克隆至转移载体pFastBacHTa中,得到pBacHT-AmPLA2,再将其转化入含穿梭载体Bacmid的受体大肠杆菌DH10Bac中,通过转座作用,得到含AmPLA2基因的重组病毒rBacmid-AmPLA2的DNA.提取其基因组DNA,用脂质体介导转染粉纹夜蛾细胞Tn-5B1-4,得到重组病毒rACV-Bac-AmPLA2.用此重组病毒感染Tn-5B1-4细胞,在细胞中表达AmPLA2.SDS-PAGE电泳结果显示,与6×His Tag融合表达的产物蛋白分子量约为18 kD左右,表达量约占细胞总蛋白的5.35%.Western blot印迹显示,融合表达产物能与意大利蜜蜂蜂毒AmPLA2抗血清发生免疫反应.生物活性测定显示,含表达产物的细胞蛋白粗提物对底物蛋黄的酶活力约为6.13 μmol·min-1·mg-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈立荣	浙江大学生物系统工程与食品科学学院	52	507	13.0	19.0
2	程家安	浙江大学应用昆虫学研究所	191	5151	38.0	60.0
3	张传溪	浙江大学应用昆虫学研究所	69	719	14.0	23.0
4	邢丽苹	浙江大学应用昆虫学研究所	5	62	5.0	5.0