消可宁对高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞增殖的调控效应

• 作者: 刘翠萍 刘超 汤淏 陆晓和 魏群利
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 糖尿病肾病 肾小球 细胞
• 年，卷（期）: 2006,（47）
• 所属期刊栏目: 内科康复相关基础实验
• 页码范围: 196-198,201
• 页数: 4页
• 分类号: R2
• 字数: 2176字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.47.038

摘要

背景:中药对早期糖尿病肾病有较好的防治作用,这一作用是基于中药有效成分的多样性而作用于糖尿病肾病不同靶点所引起的.目的:观察消可宁对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增生的影响,并探讨其可能的作用机制.设计:对照观察.单位:南京医科大学第一附属医院内分泌科.材料:实验于2003-07/2004-05在南京医科大学第一附属医院内分泌代谢研究中心细胞培养研究室完成.大鼠系膜细胞株HBZY-1:购自武汉大学中国典型培养物保藏中心.方法:系膜细胞按说明进行传代培养备用.①不同刺激浓度分组:高糖+消可宁组(消可宁分别取20.0,40.0,60.0,80.0,120.0,200.0g/L);正常糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为5.6 mmol/L;高糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为30 mmol/L,分别刺激72 h进行观察.不同刺激时间分组:正常糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为5.6 mmol/L;高糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为30 mmol/L;高糖+消可宁组,细胞液中葡萄糖浓度为30 mmol/L,消可宁浓度为60g/L;3组分别在刺激24,48,72 h给予观察.②将配置好的细胞悬液放入96孔培养板,每孔加200μL.培养板放置体积分数为0.05 CO2,37℃孵箱24 h后,取出弃上清,加入各组含不同药物及浓度的细胞液,每孔200 μL.将96孔板放入37℃含体积分数为0.05的CO2空气和100%湿度培养箱中孵育.不同刺激浓度组别于72 h后分别向板孔中加20 μL 4-甲基偶氮四唑蓝(5g/L),不同刺激时间组别于24,48,72 h后分别向板孔中加20 μL4-甲基偶氮四唑蓝(5g/L),之后均在37℃培养箱中温育4 h,置镜下观察4-甲基偶氮四唑蓝掺入细胞内,吸出上清,加入150 μL二甲基亚砜使用甲醇溶解,用平板摇床摇匀振荡30 s,于酶标仪492 nm波长读数,并记录吸光度值.主要观察指标:不同培养时间及不同消可宁培养浓度下系膜细胞增殖情况(吸光度值).结果:①不同刺激时间各组系膜细胞增殖的情况:高糖对照组刺激24,48,72 h系膜细胞吸光度值分别为0.685±0.010,0.750±0.087,0.659±0.018,高于正常糖对照组(0.586±0.054,0.598±0.040,0.527±0.047,P＜0.05),高糖对照组及正常糖对照组葡萄糖刺激系膜细胞48 h吸光度值高于24 h(P＜0.05),刺激72 h吸光度值低于48 h,(P＜0.05).高糖+消可宁组药物刺激72 h后系膜细胞吸光度值为0.538±0.023,低于高糖对照组(P＜0.05).②不同浓度消可宁刺激系膜细胞增生情况:消可宁自浓度为60.0 g/L起,可明显的阻止高糖对系膜细胞的过度刺激作用,并随着浓度的增加,这种作用逐渐增强,但过高的浓度(120.0 g/L)则出现细胞脱落死亡,极高的药物浓度(200.0g g/L)则不见存活的细胞.结论:高糖培养的系膜细胞在消可宁刺激72 h后表现出较强的抑制系膜细胞增殖的作用,在一定范围内呈剂量依赖的方式,但过高的药物浓度又表现出很强的细胞毒性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆晓和	解放军南京军区南京总医院制剂科	7	44	4.0	6.0
2	刘超	南京医科大学第一附属医院内分泌科	426	3806	27.0	40.0
3	刘翠萍	南京医科大学第一附属医院内分泌科	119	928	15.0	23.0
4	魏群利	解放军南京军区南京总医院制剂科	7	115	6.0	7.0
5	汤淏	解放军南京军区南京总医院制剂科	2	9	2.0	2.0