短柄枹ISSR-PCR反应体系的优化

• 作者: 丁丽亚 李钧敏 金则新
• 来源期刊: 福建林业科技
• 学科: 生物学
• 关键词: 短柄枹 ISSR 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 页码范围: 45-47,52
• 页数: 4页
• 分类号: Q943
• 字数: 3185字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-7351.2006.01.011

摘要

以短柄(Quercus glandulifera var. brevipetiolata)的DNA为材料,对影响PCR扩增效果的一些因素诸如模板DNA用量、Taq酶的用量、镁离子浓度、dNTP的浓度、引物用量和牛血清白蛋白浓度等指标进行筛选和优化.结果显示适合短柄ISSR-PCR分析最适宜的PCR反应条件为:10 μL PCR反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol·L-1Tris-HCl,pH 9.0,50 mmol·L-1 KCl,0.1%Triton X-100),0.75UTaq DNA聚合酶,2 mmol·L-1 MgCl2,0.2 mmol·L-1 4×dNTP,12 pmol引物,10 ng模板DNA,2 mg·mL-1牛血清白蛋白.短柄ISSR扩增较适宜的退火温度为54.4℃.