猪繁殖和呼吸综合征病毒福建毒株ORF5的序列分析及原核表达

• 作者: 吴国平 曹敏杰 苏文金 郑忠辉 郭川
• 来源期刊: 厦门大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: PRRSv 福建毒株 ORF5 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 141-145
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3894字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0438-0479.2006.01.033

摘要

根据猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)已发表的核苷酸序列,设计了一对特异性引物(p1/p2),用RT-PCR扩增PRRSV福建毒株FJ-1的全长糖基化囊膜蛋白基因(ORF5),将扩增产物连接到pUCm-T载体并转化大肠杆菌DH10B,筛选阳性重组质粒进行序列测定与分析.再设计另一条引物(p3)与p2从重组载体pUCm-T-ORF5中扩增出缺失了N端30个氨基酸残基的tGP5的编码序列tORF5,克隆入表达载体pGEX-4T-3后在大肠杆菌中表达.结果表明,FJ-1毒株ORF5基因为603 bp,编码200个氨基酸,与北美型参考毒株VR-2332、CH-1a及欧洲型参考毒株LV的氨基酸同源性分别为87%、89%和53%,推定福建毒株FJ-1属于北美型毒株.原核表达产物经过SDS-PAGE及Western Blot分析,证实为GP5与谷胱甘肽转移酶(GST)的融合蛋白.分子量为41 kDa.表达量约占菌体蛋白的15%,主要以包涵体形式存在.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹敏杰	集美大学生物工程学院	85	824	18.0	23.0
2	苏文金	集美大学生物工程学院	92	1088	20.0	27.0
3	吴国平	厦门大学生命科学学院	8	75	4.0	8.0
4	郑忠辉	厦门大学生命科学学院	49	1112	16.0	32.0
5	郭川	厦门大学生命科学学院	6	65	3.0	6.0