血管内皮生长因子受体2为靶的反义寡核苷酸筛选及其对乳腺癌MCF-7细胞的抗肿瘤作用

• 作者: 任红 伯晓晨 夏云 林汝仙 王升启 郑素军 钟森
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 反义寡核苷酸 血管内皮生长因子受体2 乳腺癌MCF-7细胞
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 248-252
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4838字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0253-3766.2006.04.003

摘要

目的筛选出可与血管内皮生长因子受体2(KDR)mRNA高效、特异结合的反义寡核苷酸,探讨其体外抗肿瘤作用.方法先用寡核苷酸库杂交和计算机预测初筛反义寡核苷酸;经寡核苷酸芯片杂交验证,挑选与KDR mRNA有强杂交信号的反义寡核苷酸,用MTT法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blotting)探讨反义寡核苷酸对乳腺癌细胞系MCF-7细胞增殖和KDR表达的抑制作用.结果在寡核苷酸库杂交筛选出的13条反义寡核苷酸中,有8条(8/13,61.5%)在芯片杂交中显示较强杂交信号;而在计算机预测设计的17条探针中,只有1条显示较强信号.合成杂交信号较强的9条硫代反义寡核苷酸,均能有效抑制MCF-7细胞增殖,并呈剂量依赖性.其中抑制率最高的2条反义寡核苷酸为asON4和asON7,由寡核苷酸库杂交联合芯片杂交筛出,在0.8 μmol/L时抑制率分别为51.6%和62.2%;同时,这2条反义寡核苷酸在mRNA水平和蛋白质水平抑制了KDR基因表达,并呈剂量相关性.结论寡核苷酸库杂交筛选和寡核苷酸芯片杂交筛选的结果有较好一致性,将寡核苷酸库和寡核苷酸芯片联用是一种较好筛选反义寡核苷酸方法.KDR反义寡核苷酸有明显的抗肿瘤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任红	重庆医科大学病毒性肝炎研究所	240	1961	23.0	35.0
2	郑素军	首都医科大学附属北京佑安医院人工肝科	79	248	8.0	10.0
3	钟森		82	309	8.0	13.0