伴刀豆球蛋白亲和色谱柱的制备及其在糖蛋白核糖核酸酶B结构分析中的应用

• 作者: 白泉 耿信笃 陈刚
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 伴刀豆球蛋白 亲和色谱 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 糖蛋白 核糖核酸酶B 蛋白质组学
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 425-431
• 页数: 7页
• 分类号: O658
• 字数: 5255字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8713.2006.05.001

摘要

通过对硅胶基质进行化学改性键合伴刀豆球蛋白(Con A),制备了对糖蛋白具有特异亲和作用的亲和色谱固定相;该固定相非特异性吸附弱,对于糖蛋白和糖肽的分离效果良好.对亲和色谱的分离条件进行了优化,以标准糖蛋白核糖核酸酶B(RNase B)为模型,对其进行了纯化;用糖苷酶切除糖链,并对切除糖链前后的RNase B用胰蛋白酶酶解;用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对亲和色谱分离得到的糖蛋白、糖链及糖肽进行了分析,确定了RNase B的一级结构、糖含量、糖基化位点及糖连接方式.该方法快速准确,适于糖蛋白和糖肽的分离表征.将其应用于血清中糖蛋白及酶解后血清中糖肽的分离富集,取得了很好的效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈刚	西北大学现代分离科学研究所现代分离科学陕西省重点实验室	53	655	15.0	23.0
2	白泉	西北大学现代分离科学研究所现代分离科学陕西省重点实验室	18	219	5.0	14.0
3	耿信笃	西北大学现代分离科学研究所现代分离科学陕西省重点实验室	80	808	14.0	26.0