RNA干涉抑制宫颈癌HPV16 E6基因的研究

• 作者: 彭芝兰 段伟强 牛晓宇 王和 程易凡 范余娟 钱晓蕾 陈悦悦
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干涉 HPV16 E6 宫颈癌 基因治疗
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-18
• 页数: 5页
• 分类号: R737.3
• 字数: 4046字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2006.01.004

摘要

目的采用RNA干涉(RNAi)技术干扰宫颈癌HPV16 E6基因转录,通过体外和体内实验了解其特异性抑制HPV16 E6基因的效率.方法设计合成针对HPV16 E6的小干扰RNA(siRNA),借脂质体转染宫颈癌CaSki细胞,通过测定转染后不同时间点的细胞凋亡率、HPV16 E6 mRNA及蛋白表达变化了解基因抑制的效率.体内实验中建立子宫颈癌荷瘤裸鼠模型,将E6 siRNA直接注入瘤体,观察肿瘤体积的变化,肿瘤切片HPV16 E6免疫组化染色,观察肿瘤坏死和细胞的凋亡.结果HPV16 E6 siRNA转染细胞后24 h、48 h、5 d和9 d时凋亡率分别为7.7%、11.8%、37.4%和12.6%.RT-PCR显示转染后24 h、48 h、5 d和9 d HPV16 E6 mRNA量减少了77%、83%、59%和41%.Western blot显示转染后的HPV16 E6蛋白表达在24 h、48 h、5 d明显减少,9 d时有所恢复;流式细胞仪HPV16 E6蛋白定量测定结果显示,转染后24 h、48 h、5 d和9 d蛋白表达抑制率分别为79.7%、80.4%、71.3%和57.4%.体内实验瘤内注射HPV16 E6 siRNA明显抑制肿瘤的生长,HPV16 E6蛋白表达明显受抑,肿瘤组织坏死和细胞凋亡增加,重复给药较单次给药效果更好.结论体内和体外实验均表明RNA干涉HPV16 E6基因的效果具有特异性和高效性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王和	四川大学华西第二医院妇产科	86	524	13.0	18.0
2	彭芝兰	四川大学华西第二医院妇产科	244	1471	17.0	27.0
3	牛晓宇	四川大学华西第二医院妇产科	39	309	8.0	16.0
4	陈悦悦	四川大学华西第二医院妇产科	23	80	6.0	8.0
5	范余娟	四川大学华西第二医院妇产科	7	31	4.0	5.0
6	段伟强	四川大学华西医院烧伤整形科	34	117	6.0	9.0
7	程易凡		8	168	6.0	8.0
8	钱晓蕾	四川大学华西第二医院妇产科	14	72	5.0	8.0