伯氏疟原虫类巨噬细胞移动抑制因子的表达和纯化

• 作者: 刘忠湘 李淑梅 李珣 薛采芳 赵亚 陈俊
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 疟原虫,伯氏 巨噬细胞移动抑制因子 基因表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 47-50
• 页数: 4页
• 分类号: R382.31
• 字数: 2533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5234.2006.01.014

摘要

目的表达和纯化伯氏疟原虫类巨噬细胞移动抑制因子(PbMIF). 方法根据GenBank中PbMIF mRNA的预测序列,设计特异引物,采用RT-PCR方法从伯氏疟原虫ANKA株红内期RNA扩增获得PbMIF基因.将PbMIF基因与T载体连接并测序,利用NCBI中Blast程序分析测序结果.阳性T/A克隆质粒经BamH I和XhoI双酶切后,将目的片段克隆至原核表达载体pET28a,并转化大肠埃希菌BL21(DE3),收集经IPTG诱导表达的细菌进行SDS-PAGE分析,并对表达产物进行亲和纯化.结果从伯氏疟原虫RNA中扩增到PbMIF cDNA,长度为351 bp,编码116个氨基酸.测序结果显示,其核苷酸序列与GenBank中PbMIF cDNA的预测序列完全一致,编码的氨基酸在一级结构上与恶性疟原虫类巨噬细胞移动抑制因子(PfbbMIF)的同源性为76%,与人类和小鼠MIF的同源性为31%.表达产物为可溶性的PbMIF蛋白,亲和纯化后的PbMIF蛋白纯度为71%.结论表达并纯化出可溶性PbMIF蛋白,为进一步研究疟原虫的生物学特性奠定了物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛采芳	第四军医大学病原生物学教研室	61	228	7.0	11.0
2	赵亚	第四军医大学病原生物学教研室	40	90	6.0	8.0
3	刘忠湘	第四军医大学病原生物学教研室	49	141	5.0	10.0
4	李珣	西藏军区总医院实验中心	20	63	4.0	6.0
5	陈俊	第四军医大学病原生物学教研室	19	94	6.0	9.0
6	李淑梅	第四军医大学病原生物学教研室	14	24	3.0	3.0