兔软骨细胞与脱细胞软骨基质的生物相容性

• 作者: 关德宏 杨大平 王冬艳 郭铁芳 韩雪峰
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 生物医学工程 组织学技术 细胞外基质 生物相容性材料
• 年，卷（期）: 2006,（21）
• 所属期刊栏目: 组织工程研究
• 页码范围: 91-93,插5
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 5326字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.21.035

摘要

目的:将体外培养的兔软骨细胞种植到脱细胞软骨基质上,进行细胞形态学观察、细胞黏附及增殖活性的测定,检测制备的脱细胞软骨基质与软骨细胞的相容性,分析脱细胞软骨基质作为软骨组织工程支架的可能性.方法:实验于2005-03/09在哈尔滨医科大学附属第二医院科研中心完成.选取兔龄6个月的清洁级健康雄性日本大耳白兔,麻醉后无菌条件下显露兔双侧膝关节,切取股骨远端和胫骨近端关节软骨,经脱细胞处理制备成脱细胞软骨基质微粒作为软骨支架,并分离培养软骨细胞.将培养至第2代的软骨细胞用于实验,随机分为脱细胞基质组和空白对照组,每组复孔为6孔.脱细胞基质组将脱细胞基质颗粒单层铺满培养板孔底,接种软骨细胞.空白对照组单纯接种软骨细胞.倒置显微镜及扫描电镜观察软骨细胞与脱细胞软骨基质的黏附情况,通过四甲基偶氮唑盐法检测细胞接种2,6,12,24 h细胞黏附性,测定细胞接种后1,3,5,7 d时细胞的增殖活性,测定细胞培养1,2,3 d时上清液中的羟脯氨酸含量.结果:①软骨细胞在脱细胞基质上黏附的形态学观察:扫描电镜观察脱细胞基质颗粒呈不规则多角形,软骨巢内的软骨细胞消失,表面粗糙不平.倒置相差显微镜下观察软骨细胞刚开始为小圆形,折光性较强,接种2 h后有少量细胞开始黏附于脱细胞基质上,随时间的延长细胞黏附数量增加.②接种后不同时间点两组软骨细胞黏附情况的测定结果:与空白对照组比较,接种2 h时脱细胞基质组软骨细胞黏附性明显降低(P＜0.05),而在接种6,12,24 h时两组基本相似(P＞0.05).③接种后不同时间点两组软骨细胞增殖能力的比较:接种1,3,5,7 d时,脱细胞基质组软骨细胞增殖活性分别高于空白对照组21.4%,32.7%,32.5%,25.4%,差异显著(P＜0.05).④接种后不同时间点两组软骨细胞羟脯氨酸含量的比较:接种后第1,2天,脱细胞基质组上清液中的羟脯氨酸含量与空白对照组接近(P＞0.05).接种第3天时,脱细胞基质组羟脯氨酸含量高于空白对照组20.28%,差异显著(P＜0.05).结论:实验制备的脱细胞软骨基质能够明显刺激增殖软骨细胞,且与软骨细胞具有良好的相容性,为组织工程支架的应用提供了新的材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	关德宏	哈尔滨医科大学附属第二医院整形手显微外科	24	202	8.0	13.0
2	杨大平	哈尔滨医科大学附属第二医院整形手显微外科	87	872	15.0	27.0
3	郭铁芳	哈尔滨医科大学附属第二医院整形手显微外科	27	351	10.0	18.0
4	王冬艳	哈尔滨医科大学附属第二医院整形手显微外科	18	136	6.0	11.0
5	韩雪峰	哈尔滨医科大学附属第二医院整形手显微外科	30	316	9.0	17.0