用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素

• 作者: 何承伟 刘芳 马卫列
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 内皮抑素 硫氧还蛋白融合表达系统 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1322-1325
• 页数: 4页
• 分类号: R730
• 字数: 3871字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2006.09.012

摘要

目的利用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素(endostatin).方法采用PCR技术从pMFGendo质粒上扩增出小鼠endostatin完整的cDNA序列,将其克隆至硫氧还蛋白融合表达载体pThiohisA中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导表达重组融合蛋白,SDS-PAGE分析表达产物为包涵体,将包涵体纯化后通过镍柱亲和层析得到纯化的、可溶性的小鼠内皮抑素,经SDS-PAGE分析鉴定.结果高效表达出相对分子量约32KD的重组融合蛋白,灰度扫描软件分析显示,其表达量占菌体总蛋白质的35.9%,经镍柱亲和层析获得了高纯度的小鼠内皮抑素重组融合蛋白,纯度可达95%,得率为0.27g/L.结论用硫氧还蛋白融合表达系统在大肠杆菌中表达的小鼠内皮抑素重组融合蛋白易纯化并具有高活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马卫列	广东医学院生化教研室	22	39	4.0	5.0
2	何承伟	广东医学院生化教研室	35	278	9.0	15.0
3	刘芳	广东医学院生化教研室	10	46	4.0	6.0