质粒介导shRNA对心肌细胞kir2.1 蛋白表达和搏动频率的影响

• 作者: 李凡东 范全心 邹承伟 雷印胜
• 来源期刊: 中国胸心血管外科临床杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干扰 Kir2.1 质粒 生物起搏器
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 28-31
• 页数: 4页
• 分类号: Q813
• 字数: 4230字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4848.2006.01.009

摘要

目的构建抑制大鼠心肌细胞kir2.1基因的真核表达质粒pEGFP6-kir2.1,观察对大鼠心肌细胞kir2.1信使RNA(mRNA)、蛋白表达情况及搏动频率的影响. 方法选择5个针对大鼠心肌细胞kir2.1基因的RNA干扰(RNA mterference)位点,设计合成5对相应的寡核苷酸链,形成双链后依次将其连入带有U6启动子的载体,得到含5个目的基因的重组质粒pEGFP6-kir2.1.转染大鼠心肌细胞,并将其分为3组:实验组、阴性质粒对照组和空白对照组.转染后72h,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法(Western-blotting)检测kir2.1mRNA和蛋白表达情况,并观察细胞搏动频率.结果转染后72h,实验组心肌细胞kir2.1 mRNA和蛋白表达明显低于两对照组(P＜0.01),两对照组间比较差别无统计学意义;实验组搏动频率增加,并显著高于两对照组(P＜0.01),两对照组之间搏动频率差别无统计学意义.结论真核表达质粒pEGFP6-kir2.1能明显抑制大鼠kir2.1基因的表达,提高大鼠心肌细胞的自律性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹承伟	山东省立医院心外科	50	109	6.0	8.0
2	范全心	山东省立医院心外科	53	100	6.0	8.0
3	李凡东	济南军区总医院心外科	50	235	9.0	13.0
4	雷印胜	山东省立医院心外科	2	3	1.0	1.0