针对多效蛋白基因的小干扰RNA的设计及其稳定表达载体的构建

• 作者: 刘敏丽 李刚 胡迎春 霍艳英 项晓琼
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 小干扰RNA 多效蛋白基因 基因表达
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 509-511
• 页数: 3页
• 分类号: Q75|Q78
• 字数: 3240字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2006.04.008

摘要

目的:设计多效蛋白基因特异性的小干扰RNA(siRNA),并构建一系列能在哺乳动物细胞内稳定表达这些siRNA的表达质粒,以便为在体外研究多效蛋白基因的功能打下基础.方法:设计并合成具有多效蛋白基因特异性的一组寡核苷酸片段,并克隆到pSilencer 3.1-H1 hygro载体;用脂质体LipofectAMINE 2000转染和潮霉素筛选等方法建立能稳定表达相应siRNA的一组Pten-/-细胞克隆;利用Northern印迹检测这些细胞内多效蛋白基因的表达情况.结果:设计并构建了3个针对多效蛋白基因的siRNA表达质粒,并证明其中的1种质粒能在Pten-/-细胞内稳定表达相应的siRNA,并显著地抑制了该细胞多效蛋白基因的表达.结论:设计并构建出的针对多效蛋白基因的siRNA表达载体所表达的siRNA具有较强的RNA干涉功能,为多效蛋白基因的功能研究奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李刚	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	36	165	7.0	11.0
2	霍艳英	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	35	153	6.0	10.0
3	刘敏丽	重庆医科大学病理学教研室	6	21	3.0	4.0
4	胡迎春	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	35	128	6.0	9.0
5	项晓琼	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	14	113	6.0	10.0