密码修饰可增强沙眼衣原体MOMP DNA质粒免疫小鼠的免疫应答

• 作者: 于晗 周亚滨 唐伟 杨熙 栾怡 王红 程轶喆 赵蔚明 郑燕 齐眉
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 沙眼衣原体 MOMP 密码子 蛋白表达 DNA质粒免疫
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 疫苗学
• 页码范围: 92-96
• 页数: 5页
• 分类号: R77
• 字数: 4693字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2006.01.025

摘要

目的探讨密码修饰对沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因表达和DNA质粒免疫的影响.方法根据人类密码子使用偏好对鼠肺炎沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis mouse pneumonitis)MOMP基因进行优化修饰,设计合成人源化MOMP基因(HuMOMP).构建以pcDNA3为载体的含HuMOMP及含野生型MOMP基因(WtMOMP)的真核表达质粒.瞬时转染COS-1细胞,Western blot方法比较HuMOMP基因及WtMOMP基因在哺乳动物细胞中的蛋白表达水平.DNA质粒肌内免疫BALB/c小鼠,检测小鼠血清特异性抗体、DTH和淋巴细胞增殖反应,比较优化密码MOMP基因和野生型MOMP基因DNA质粒免疫的免疫效果.结果人工合成HuMOMP基因,成功构建重组真核表达质粒pcDNA3-HuMOMP及pcDNA3-WtMOMP.转染细胞Western blot结果显示,HuMOMP基因的蛋白表达水平明显高于WtMOMP基因.ELISA结果表明,HuMOMPDNA质粒免疫组小鼠血清特异性IgG抗体有所升高;细胞免疫检测结果显示,HuMOMP DNA质粒免疫组小鼠足垫肿胀程度增强、淋巴细胞增殖实验刺激指数(SI)增高,两者与WtMOMP DNA质粒免疫组相比P＜0.05,差异均有统计学意义.结论人源化密码修饰能够增强沙眼衣原体MOMP基因在哺乳动物细胞中的蛋白表达及DNA质粒免疫小鼠的免疫反应,这对于新型衣原体DNA疫苗的研究具有重要意义.