RNA干扰抑制整合素β1在人表皮干细胞中的表达

• 作者: 伍素华 刘月明 唐红英 孙荣距 梁光萍 罗向东 苏踊跃 陈建
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 抗原,CD29 转染 表皮干细胞
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 218-221
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3842字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2006.03.016

摘要

目的观察整合素β1对人表皮干细胞(KSC)增殖与分化的影响.方法选择人整合素β1RNA干扰靶点特异性的寡核苷酸,连接到小干扰RNA(siRNA)表达质粒pSilencer 3.1/H1上,将其转染到KSC中,并根据转染的方式将KSC分为非转染、转染空载体、转染si整合素β1-1、转染si整合素β1-2、转染siNegative 5个部分.通过蛋白质印迹法检测各部分KSC整合素β1蛋白的表达水平,并筛选出最有效的阳性载体,将其命名为si整合素β1进行后续实验;通过逆转录聚合酶链反应检测各部分KSC整合素β1mRNA的表达水平,上述检测均重复测定5次.结果非转染、转染空载体的KSC不能抑制整合素β1蛋白的表达;转染si整合素β1-1、si整合素β1-2的KSC能够在蛋白水平抑制整合素β1的表达,并且后者效果强于前者,抑制效率达到60%～70%,将其命名为si整合素β1;si整合素β1使KSC中整合素β1mRNA水平明显下降,抑制效率约达70%.结论重组质粒转染KSC后可下调整合素β1mRNA及其蛋白的表达.