α-半乳糖苷酶基因Mell在毕赤酵母中的组成型表达

• 作者: 唐香山 张学文 张金谌 章怀云
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: α-半乳糖苷酶 Mell基因,重组质粒pGAPZα-Mell 组成型表达
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 269-272
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 3228字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2006.02.025

摘要

用PCR方法从酵母(Saccharomyces cerevisiae)AH109中扩增出α-半乳糖苷酶的Mell基因,将其克隆至整合型载体pGAPZαA中构建成组成型分泌表达酶产物的重组质粒pGAPZα-Mell.将线性化的重组质粒pGAPZα-Mell电击转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)KM71,在含有100 mg/mL zeocin和预先涂布有X-α-gal的YPDS平板上选择蓝色阳性菌落.发酵培养酵母的上清经SDS-PAGE分析,在53 kD处有特异带;经非变性PAGE凝胶电泳,与显色底物的反应,检测到α-半乳糖苷酶活性带.重组菌pGAPZα-Mell/KM71摇瓶发酵6 d后,培养液α-半乳糖苷酶粗酶活性为12 U/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学文	湖南农业大学生物科学技术学院	120	939	18.0	24.0
2	章怀云	中南林业科技大学生命科学与技术学院	45	373	12.0	16.0
3	唐香山	湖南农业大学生物科学技术学院	5	35	3.0	5.0
4	张金谌	湖南农业大学生物科学技术学院	3	6	2.0	2.0