鸡胚原始生殖细胞的分离、培养及鉴定

• 作者: 刘红云 唐新燕 张才乔 曾卫东 米玉玲
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 原始生殖细胞 鸡胚 细胞增殖 体外培养
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 174-177,插页1
• 页数: 5页
• 分类号: S185
• 字数: 2975字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2006.02.006

摘要

采用Ficoll密度梯度离心法分离第19期(孵化68～72 h)艾维茵鸡(Gallus domesticus)生殖嵴原始生殖细胞(PGC),通过体细胞-PGC共培养进行了原代和传代培养,对PGC进行了碱性磷酸酶(AKP)和过碘酸雪夫氏反应(PAS)鉴定,并用细胞增殖核抗原(PCNA)免疫细胞化学检测了传代于鸡胚饲养层上PGC的增殖活性.培养的PGC经AKP和PAS鉴定均为阳性,AKP阳性为红棕色,PAS阳性为深红色,PCNA染色显示PGC集落为红棕色,表明PGC处于增殖状态.同时比较了不同体外培养条件(5%～20%胎牛血清(FCS),ITS培养液(M199+10μg/mL胰岛素+5μg/mL转铁蛋白+3×10-8 mol/L亚硒酸钠),条件培养液,15%FCS+ITS,15%FCS+40%条件培养液)下PGC增殖情况.发现未经密度梯度离心的PGC生长较离心的PGC好,且5%FCS在原代培养中起较好的促增殖作用;而传代培养时在不同培养条件下,5%FCS组或ITS组形成的PGC集落的直径较大,而仅用单纯的条件培养液效果并不明显.结果表明除鸡胚饲养层可作为PGC增殖的支持体系外,在体细胞-PGC共培养方式下5%FCS或单独的ITS也可作为PGC体外增殖的一种培养体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张才乔	浙江大学动物科学学院	42	288	10.0	14.0
2	刘红云	浙江大学动物科学学院	39	314	10.0	16.0
3	米玉玲	浙江大学动物科学学院	13	82	5.0	8.0
4	曾卫东	浙江大学动物科学学院	26	225	9.0	14.0
5	唐新燕	浙江大学动物科学学院	2	10	2.0	2.0