人胎盘天然金属蛋白酶抑制因子3的分离纯化

• 作者: 吴鹏 张忠 徐军 韩琳
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 金属蛋白酶类组织抑制剂 基质金属蛋白酶类 分离和提纯
• 年，卷（期）: 2006,（29）
• 所属期刊栏目: 组织工程研究
• 页码范围: 182-183
• 页数: 2页
• 分类号: R3
• 字数: 1222字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.29.039

摘要

背景:基质金属蛋白酶是一类可促进肿瘤生长和转移的蛋白分解酶家族,其活性可被组织金属蛋白酶抑制因子所抑制.其中组织金属蛋白酶抑制因子3的抑制作用更为重要.目的:旨在从人胎盘中完全分离纯化天然组织金属蛋白酶抑制因子3,并建立组织金属蛋白酶抑制因子3酶联免疫测定方法.设计:单一样本观察.单位:沈阳医学院中心实验室.材料:人胎盘来自沈阳医学院附属奉天医院妇产科(家属知情同意);基质金属蛋白酶1来自富士药品研究所.方法:实验于2001-03/2002-05在沈阳医学院中心实验室完成.①利用4 mol/L尿素Tris缓冲液(pH8.0),制备胎盘匀浆液.②匀浆液经CM52阳离子交换树脂层析和Sephacryl S-200凝胶过滤二步柱层析.③SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测相对分子量及纯度.④Western blotting鉴定纯化蛋白的性质.⑤免疫荧光法测定组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1的抑制率.主要观察指标:①聚丙烯酰胺电泳法所示蛋白带相对分子质量.②Western blot的显色结果.③组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1的抑制率.④纯化后组织金属蛋白酶抑制因子3的回收率.结果:①人胎盘分离纯化的组织金属蛋白酶抑制因子3分为非糖化和糖化两种,相对分子质量分别为24 000和27 000两种.②非糖化和糖化的组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1的抑制活性分别为1.1×1010mol/L和1.2×1010mol/L.胎盘来源的组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1的抑制活性明显高于重组的组织金属蛋白酶抑制因子3.③二步层析后组织金属蛋白酶抑制因子3的回收率为23.4%.结论:人胎盘胞外基质来源的组织金属蛋白酶抑制因子3是由非糖基化蛋白和糖基化蛋白组成;两种纯化的组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1具有明显的抑制活性,且显著高于重组金属蛋白酶抑制因子3.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴鹏	沈阳医学院中心实验室	28	110	7.0	8.0
2	徐军	沈阳医学院中心实验室	19	93	6.0	8.0
3	张忠	沈阳医学院中心实验室	64	217	9.0	12.0
4	韩琳	沈阳医学院中心实验室	12	42	4.0	5.0