ΔNp63 shRNA表达质粒的构建及在膀胱癌中的作用

• 作者: 何云锋 吴小候 张良锁 田代印 罗春丽 高飞
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: ΔNp63 shRNA 质粒 膀胱肿瘤
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 820-825
• 页数: 6页
• 分类号: R73
• 字数: 4676字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0253-3766.2006.11.005

摘要

目的 构建ΔNp63特异性短发夹RNA(shRNA)的表达载体,探讨其在膀胱移行细胞癌(TCCB)细胞中的作用.方法 设计、合成ΔNp63特异性的短链寡核苷酸,克隆到Pgenesil-1质粒载体中,构建ΔNp63特异shRNA表达载体,转染TCCB细胞;免疫组化S-P法检测ΔNp63蛋白表达水平,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ΔNp63 mRNA的表达水平,流式细胞术(FCM)检测细胞周期,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性.结果 经PstⅠ和SalⅠ双酶切和测序鉴定,成功构建ΔNp63-shRNA质粒表达载体,并能够成功转染TCCB细胞.转染后可显著抑制细胞中ΔNp63蛋白和mRNA的表达,其中ΔNp63 mRNA的表达抑制率为63.0%;G0/G1期细胞显著增加,为(66.38±3.08)%,S期细胞显著减少,为(33.68±2.06)%;细胞增殖活性明显降低.结论 运用Pgenesil-1质粒载体构建的ΔNp63-shRNA表达载体可成功转染TCCB细胞,有效抑制ΔNp63蛋白和mRNA表达,并可调控TCCB细胞的细胞周期,抑制其增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴小候	重庆医科大学附属第一医院泌尿外科	234	955	14.0	18.0
2	罗春丽	重庆医科大学检验系	119	493	12.0	15.0
3	张良锁	重庆医科大学附属第一医院泌尿外科	3	3	1.0	1.0
4	何云锋	重庆医科大学附属第一医院泌尿外科	58	244	8.0	12.0
5	田代印	重庆医科大学附属儿童医院呼吸内科	24	130	7.0	10.0
6	高飞	重庆医科大学附属第一医院泌尿外科	7	24	2.0	4.0