共表达与牛疱疹病毒1型VP22融合的猪繁殖与呼吸综合征病毒E及M蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其免疫原性观察

• 作者: 严琳 余晓岚 宋云峰 方六荣 江云波 肖少波 赵武 陈焕春
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛疱疹病毒1型VP22 猪繁殖与呼吸综合征病毒 修饰型ORF5基因 ORF6基因 重组伪狂犬病毒
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 401-407
• 页数: 7页
• 分类号: S858.285.3|Q784
• 字数: 5504字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2006.04.018

摘要

为了研制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因工程疫苗,以伪狂犬病毒(PRV)gE基因缺失标志疫苗株TK-/gE-/LacZ+为病毒载体,通过同源重组,构建了共表达与牛疱疹病毒1型VP22(BHV-1 VP22)融合的PRRSV E及M蛋白的重组伪狂犬病毒(rPRV)TK-/gE/VP22E+/VP22M+.经PCR、Southern blot、Westernblot证实rPRV构建正确,并能表达与BHV-1 VP22融合的PRRSV E及M蛋白.rPRV在IBRS-2、PK-15细胞中的增殖滴度与PRV亲本株相比无显著差异,表明外源基因的插入不影响rPRV增殖.用该rPRV免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠抗PRRSV中和抗体及脾淋巴细胞增殖反应,并与未融合VP22的单表达PRRSV E蛋白及共表达E及M蛋白的rPRV TK-/gE-/E+与TK-/gE-/E+/M+进行比较.结果显示TK-/gE-/VP22E+/VP22M+可诱导小鼠产生更好的体液与细胞免疫反应,BHV-1 VP22发挥了佐剂效应.本研究为研制安全、有效的猪繁殖与呼吸综合征-伪狂犬病二价基因工程疫苗奠定了基础.