密度梯度离心法结合贴壁培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性

• 作者: 刘慧雯 张宇 张宝东 李冬梅 李呼伦 金连弘
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓细胞 干细胞 生物学 大鼠
• 年，卷（期）: 2006,（17）
• 所属期刊栏目: 干细胞研究
• 页码范围: 18-20
• 页数: 3页
• 分类号: R551.3
• 字数: 4606字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.17.007

摘要

目的:建立一种体外分离纯化、培养扩增大鼠骨髓间充质干细胞的方法,观察成年大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性.方法:实验于2003-03/2004-05于哈尔滨医科大学组胚教研室完成.①用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化成年大鼠骨髓间充质干细胞.②采用倒置显微镜、透射电镜观察,免疫细胞化学法鉴定骨髓间充质干细胞膜抗原和细胞基质蛋白属性.③体外加成骨、成软骨诱导剂,14 d分别做碱性磷酸酶组织化学、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,观察骨髓间充质干细胞的成骨分化及成软骨分化结果.结果:①成年大鼠骨髓间充质干细胞呈均一的成纤维细胞样,具有一般干细胞的超微结构特点.②广泛表达Vimentin,CD29,CD44,不表达CD14,CD34.③加入成骨诱导剂14 d后,骨髓间充质干细胞呈多层重叠生长,现碱性磷酸酶强阳性,阳性率为90.5%.④经成软骨诱导后,Ⅱ型胶原免疫组化染色,诱导14 d的骨髓间充质干细胞呈现广泛的棕褐色染色,在细胞密集处细胞周围可见黄褐色染色.结论:密度梯度离心结合贴壁培养法能有效分离纯化成年大鼠骨髓间充质干细胞,用此种方法培养的细胞具有骨髓间充质干细胞的一般生物学特性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宇	哈尔滨医科大学组胚教研室	41	188	7.0	10.0
2	金连弘	哈尔滨医科大学组胚教研室	59	263	8.0	12.0
3	李冬梅	哈尔滨医科大学组胚教研室	34	143	6.0	10.0
4	李呼伦	哈尔滨医科大学神经生物教研室	65	353	11.0	14.0
5	刘慧雯	哈尔滨医科大学组胚教研室	59	214	8.0	10.0
6	张宝东	哈尔滨医科大学组胚教研室	15	61	5.0	7.0