目的:运用荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)技术检测精子改良上游过程中,不同上游时间对含X/Y精子的分离作用,探讨较长上游时间跨度(0~150分钟)对上游后XY精子比例的影响.方法:分析从志愿者取得的正常精液标本10份,每份均进行精子不同时间分批改良上游、固定和荧光原位杂交分析,计数分析X精子占XY精子总数的比例.结果:杂交区域内精子总杂交率为98.33%.未上游时X精子比例为平均为50.03%.通过SPSS方差分析:分时间段检测的X精子占XY精子总数的比例与未上游时差异无显著性(P>0.05),不同组间差异无显著性(P均>0.05).结论:改良上游法对XY精子的分离没有显著效果,没有直接证据表明人工授精和体外受精-胚胎移植过程中精子的上游处理会影响到出生婴儿的性别比例.