腺相关病毒载体介导的PLB基因反义RNA对大鼠心肌细胞肌浆网Ca2+-ATPase活性和[Ca2+]i的作用

• 作者: 姚宇玫 孙坚 朱朝晖 李江 汪国忠 胡申江 赵晓燕 郑霞 陈乃云
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 磷酸受纳蛋白 腺病毒科 RNA,反义 Ca(2+)转运ATP酶 心肌
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 39-42
• 页数: 4页
• 分类号: R363
• 字数: 4007字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2006.01.009

摘要

目的:探讨腺相关病毒载体介导的磷酸受纳蛋白(PLB)反义RNA对肌浆网Ca2+-ATPase活性以及细胞内钙浓度([Ca2+]i)的作用.方法:构建PLB反义RNA的重组腺相关病毒载体(rAAV-asPLB)和携带报告基因LacZ的重组腺相关病毒载体(rAAV-LacZ).分别转染培养的大鼠心肌细胞,测定PLB mRNA和蛋白质表达,检测肌浆网Ca2+-ATPase活性和[Ca2+]i.结果:RT-PCR和Western blotting显示,感染rAAV-asPLB的心肌细胞的PLBmRNA和蛋白质表达低于正常对照和感染rAAV-LacZ组;而Ca2+-ATPase活性大于正常对照和感染rAAV-LacZ组.激光共聚焦显微镜检测显示,静息状态时,rAAv-asPLB感染组[Ca2+]i降低;异丙肾上腺素刺激后,各组[Ca2+]i均升高,但是rAAV-asPLB感染组[Ca2+]i变化幅度大.结论:腺相关病毒介导的PLB反义RNA对大鼠心肌细胞PLB表达具有抑制作用,增强Ca2--ATPase活性,降低静息状态的[Ca2+]i,增加异丙肾上腺素刺激后[Ca2+]i的变化幅度.