人分泌型磷脂酶A2(hsPLA2-ⅡA)基因的克隆、表达及活性鉴定

• 作者: 廖玉华 殷秀飞 汪家权
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人分泌型磷脂酶A2 融合表达 酶活性鉴定
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 93-97
• 页数: 5页
• 分类号: Q5
• 字数: 3223字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2006.08.019

摘要

目的:为了构建人分泌型磷脂酶A2(secretary phospholipase A2,sPLA2-ⅡA)的有效表达系统,从胎脾中提取总RNA.方法:采用RT-PCR方法扩增出编码sPLA2-ⅡA的基因定向地克隆于硫氧环蛋白基因融合表达载体pET32a的TrxA基因3′末端,构建符合读码框的融合表达载体pET32a-sPLA2-ⅡA.37℃下经IPTG诱导,hsPLA2-ⅡA融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,表达产物以包涵体的形式存在.包涵体经8mol/L尿素溶解、复性后检测结果显示具有较高的催化活性并呈现剂量依赖关系.结论:以大肠杆菌为宿主,成功表达了hsPLA2-ⅡA蛋白,为进一步进行hsPLA2-ⅡA的大量生产和功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪家权		3	26	2.0	3.0
2	殷秀飞		3	9	1.0	3.0
3	廖玉华		3	11	2.0	3.0