反义外壳蛋白基因介导的抗SCMV转基因玉米研究

• 作者: 张锦鹏 杨红春 王国英 王茅雁 白云凤 苟明月 董志刚 赵晋锋 郑军
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 玉米 抗SCMV 反义外壳蛋白基因 无标记基因表达载体
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 661-665
• 页数: 5页
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0496-3490.2006.05.006

摘要

玉米矮花叶病(MDM)是一种世界性病害,在我国主要由甘蔗花叶病毒(SCMV)所致.为探索一条高效、安全的抗SCMV转基因途径,构建了无标记基因的SCMV反义外壳蛋白基因(cp)表达载体pACP.通过冻融法将该载体与抗除草剂标记基因(bar)载体分别导入农杆菌LBA4404,然后共转化玉米自交系综3的幼胚.通过除草剂梯度筛选,从抗性愈伤组织分化获得了35株再生苗.PCR检测证明,其中26株带有抗除草剂标记基因(bar),14株带有SCMV反义cp基因.这14株带有目的基因的玉米植株自交,其种子在田间种植成株行(T1代).玉米T1代幼苗人工接种SCMV,筛选出2个抗病株率高于70%的株行.ELISA检测表明,抗病株SCMV含量极低,抗性达高抗水平.PCR检测表明,抗病性是反义cp基因作用的结果,并且获得了2株cp基因阳性而标记基因阴性的抗病株.