抗凋亡蛋白Fortilin基因的克隆、表达与鉴定

• 作者: 吴芬芳 吴英松 宁云山 李明 王穗海 董文其
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Fortilin蛋白 克隆 表达 鉴定
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏
• 页码范围: 627-630
• 页数: 4页
• 分类号: R73-362
• 字数: 2770字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2006.06.005

摘要

目的在大肠杆菌中表达一种新近发现的抗凋亡蛋白Fortilin.方法用RT-PCR方法,从肺腺癌细胞中扩增出编码Fortilin蛋白的基因(GenBank中编码该蛋白的基因名为TPT1),克隆入pGEX-4T-1表达载体;重组质粒转入E.coli BL21(DE3),诱导表达Fortilin蛋白,并对表达产物进行免疫印迹鉴定.结果 经双酶切及核酸序列分析鉴定,重组质粒pGEX-4T-1/TPT1成功构建,诱导后能高效表达可溶性Fortilin融合蛋白,SDS-PAGE及Western-blot验证该蛋白,表达的融合蛋白分子量为45 000,与预期理论值相符.结论 Fortilin蛋白在大肠杆菌中以融合蛋白形式进行表达,可提高其在宿主细胞中的稳定性和可溶性,且在大肠杆菌中获得高效表达,获得了充足的活性蛋白,这为进一步了解该蛋白的生物学功能,研究其抗凋亡机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明	南方医科大学生物技术学院	212	862	14.0	18.0
2	吴英松	南方医科大学生物技术学院	123	499	11.0	16.0
3	王穗海	南方医科大学生物技术学院	33	92	5.0	7.0
4	宁云山	南方医科大学生物技术学院	29	79	4.0	7.0
5	董文其	南方医科大学生物技术学院	43	142	6.0	9.0
6	吴芬芳	南方医科大学生物技术学院	4	6	2.0	2.0