胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、原代培养与鉴定

• 作者: 张建平 杨冬梓 王振花 陈慧
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 胎鼠 肺泡Ⅱ型细胞 原代培养 分离 鉴定
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 496-499,505
• 页数: 5页
• 分类号: R714
• 字数: 4026字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2006.05.005

摘要

[目的]探讨胎鼠肺泡Ⅱ型细胞原代培养及鉴定方法,建立肺泡Ⅱ型细胞培养模型,为体外研究肺泡Ⅱ型细胞及胎儿肺发育提供实验手段.[方法]采用低浓度胰酶消化20 d胎鼠肺组织,经差速离心和特异性免疫吸附后,分离、纯化胎鼠肺泡Ⅱ型细胞,进行原代培养;根据细胞生长特点、形态特征、细胞表型和肺表面活性特异蛋白A的分泌,用免疫细胞化学染色、透射电镜及酶联免疫吸附法对分离的细胞进行形态学和功能鉴定.[结果]原代培养的肺Ⅱ型细胞12 h开始贴壁,外观呈多边形,岛状生长.培养的24～48 h,细胞连接成单层,胞浆内颗粒明显,培养的6～7 d细胞内颗粒大量减少;免疫细胞化学鉴定细胞肺表面活性特异蛋白A(surfactant protein A,SP-A)染色阳性,透射电镜可见观察到细胞内板层小体,培养液中SP-A含量随培养时间延长逐渐增多,于培养36 h达峰值,为80 ng/mL;细胞纯度达(92±2)%,产量为(18.6±7)×106.[结论]差速离心和免疫黏附法是一种高效的分离和纯化胎肺Ⅱ型细胞的方法,所得细胞产量大、纯度高,可以用于体外研究肺泡Ⅱ型细胞和晚期胎肺发育的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张建平	中山大学附属第二医院妇产科	328	2687	27.0	44.0
2	陈慧	中山大学附属第二医院妇产科	165	1057	19.0	28.0
3	王振花	中山大学附属第二医院妇产科	22	274	10.0	16.0
4	杨冬梓	中山大学附属第二医院妇产科	241	1919	22.0	30.0