丙型肝炎病毒NS3区7个抗原表位融合基因载体的构建及在真核细胞的表达

• 作者: 李煜 杨梅英 杨素霞 洪宝发 高江平
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,丙型,非结构蛋白3 DNA免疫,真核细胞基因表达
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 567-569
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 3067字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2006.06.023

摘要

目的建立丙型肝炎病毒非结构蛋白3(NS3)区7个辅助T细胞抗原表位融合基因的真核表达载体,并在真核细胞中表达产物,为进一步研究应用HCV NS3序列进行预防HCV感染的DNA免疫的研究创造条件.方法合成3对相互重叠的寡核苷酸引物,涵盖NS3区7个辅助T细胞抗原表位,细胞通过重叠延伸PCR方法,将它们拼接在一起构建了一个多肽融合基因,经克隆测序后,插入真核表达载体pEGFP-N3和pBuDCE中,用构建的pEGFP-DR4质粒分别转染293T和B淋巴细胞系046W,用pBuDCE-DR4质粒转染293T细胞,用Western印迹和流式细胞仪检测其表达.结果经测序证实成功的将丙型肝炎病毒NS3区7个辅助T细胞抗原表位基因序列拼接成融合基因,构建的pEGFP-DR4质粒在293T和B淋巴细胞系046W中均表达了预期的融合蛋白36kD.构建的pBuDCE-DR4质粒在293T细胞中可观察到预期的13kD的多肽融合蛋白.结论本研究建立了能够在真核细胞表达HCVNS3区7个辅助T细胞抗原表位融合基因的细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李煜		17	57	5.0	7.0
2	杨梅英		5	43	3.0	5.0