抗人白介素-28A单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 何韶衡 傅意玲 刘岳宁 周艳春 方泽漫 李明才 陈玉珍 陈霖霏 黄阗
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 人白介素-28A 单克隆抗体 特性鉴定
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 328-330
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 2456字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2006.03.012

摘要

目的制备抗人白介素-28A(hIL-28A)单克隆抗体(mAb).方法以hIL-28A融合蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗hIL-28A mAb.采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类,通过ELISA、Western blot、免疫组化染色法、流式细胞分析、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性.结果获得2株稳定分泌抗hIL-28A mAb的杂交瘤细胞,但2株mAb均与hIL-29有弱交叉反应.2株mAb的类别均为IgM.Western blot分析表明,此mAb所识别的靶分子的相对分子质量(Mr)约为19 000.免疫组化染色表明,mAb与包皮和肺组织中的上皮细胞、结肠组织中的疑似巨噬细胞呈阳性反应.流式细胞仪分析显示,2株mAb与人脐静脉内皮细胞系HUVEC细胞的反应均呈阳性.激光共聚焦扫描显微镜观察到荧光标记的阳性反应物主要位于HUVEC细胞胞浆内.结论成功地制备抗hIL-28A mAb,为病毒感染性疾病、肿瘤和其他疾病的研究提供新的手段.