癌特异性双靶向载体的安全性及其携带基因的杀伤性

• 作者: 刘新垣 孙兰英 杨水云 王娟 肖田 顾锦法 齐荣
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤 生物疗法 溶瘤腺病毒 hTERT启动子 E1B 55KD基因 TD55
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 快速报道
• 页码范围: 385-392
• 页数: 8页
• 分类号: R737.9
• 字数: 4749字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2006.04.001

摘要

背景与目的:我们创导的"癌症的靶向双基因-病毒治疗"策略可消灭移植性肿瘤,目前最重要的是要提高其安全性,使其只靶向肿瘤细胞,而在正常细胞内不复制或者很少复制.本研究旨在构建肿瘤特异性的双靶向腺病毒TD55,并研究其安全性;在TD55中插入凋亡基因TRAIL,构建成TD55-TRAIL,研究其杀伤性.方法:用hTERT启动子控制腺病毒复制必需的E1A基因,并将E1B 55KD基因删除,构建肿瘤特异性的双靶向腺病毒TD55,使其只靶向p53功能缺乏的肿瘤.在TD55中插入凋亡基因TRAIL,构建成TD55-TRAIL,通过分子克隆构建质粒pTD55和pTD55-TRAIL,并与包装腺病毒的大质粒pBHGE3在293细胞中同源重组,得到腺病毒TD55和TD55-TRAIL.构建好的病毒体外感染人胚肺细胞MRC5、WI38,人结肠癌细胞SW620、HCT116、人肺癌细胞A549,分别用结晶紫染色法和MTT法检测其对细胞生长的影响.用流式细胞仪测定肿瘤细胞的凋亡率.结果:结晶紫染色结果和MTT结果表明,双靶向腺病毒TD55-TRAIL对正常细胞MRC5和WI38的杀伤作用比ZD55-TRAIL小很多.病毒复制能力分析表明,单靶向腺病毒在正常细胞中的复制倍数是双靶向腺病毒的3～5倍.TD55和TD55-TRAIL均能引起SW620细胞的凋亡,后者是前者的3.3倍.结论:双靶向腺病毒TD55-TRAIL对正常细胞的安全性比以往所构建的单靶向腺病毒ZD55-TRAIL更好,说明双靶向载体TD55比单靶向载体ZD55靶向性更高,如做为治疗药物可增加安全性,在治疗中可大大增加药物的安全性.携带的TRAIL基因能引起肿瘤细胞的凋亡,杀伤力较TD55增加数倍.