CXCR4-siRNA逆转录病毒载体体外靶向抑制hTERT+中瘤细胞CXCR4基因的表达

• 作者: 刘先艮 曾甫清 杜岳峰 王美玉 邢毅飞 陆鹏
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干扰 趋化因子受体4 人端粒酶逆转录酶 肿瘤 转移
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 887-892
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4862字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2006.10.002

摘要

目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的趋化因子受体4(CXCR4)的RNA干扰逆转录病毒载体,并研究其在hTERT+前列腺癌细胞、乳腺癌细胞中的表达.方法:用PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的Pgensil-1质粒,以hTERT启动子代替U6启动子,再将重组基因片段导入到逆转录病毒真核表达载体PLXSN中,行限制性酶切鉴定.转染PA317病毒包装细胞,收获病毒上清分别转染前列腺癌细胞PC-3m、LNCaP及人胚肺成纤维细胞MRC5和人乳腺癌细胞MCF7,RT-PCR检测CXCR4 mRNA表达.结果:限制性酶切鉴定该重组质粒,成功构建了PLXSN/EGFP-hTERT-siCXCR4.与空载体组比较,PC-3m、LNCaP、MCF7细胞中CXCR4-siRNA对CXCR4 mRNA的48 h抑制率分别为(87.02±10.34)%、(61.70±9.77)%、(88.31±9.20)%.MRC5细胞中PLXSN-hTERT-siCXCR4对CXCR4 mRNA不抑制.结论:该逆转录病毒系统中hTERT启动子调控的下游RNA干扰序列可选择性地在hTERT+前列腺癌细胞、乳腺癌细胞中表达,在hTERTMRC5细胞不表达,具有显著的靶向性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邢毅飞	华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科	50	271	9.0	15.0
2	曾甫清	华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科	253	1463	17.0	24.0
3	杜岳峰	华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科	13	32	3.0	5.0
4	王美玉	西安交通大学第二医院泌尿外科	10	43	3.0	6.0
5	陆鹏	华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科	13	75	5.0	8.0
6	刘先艮	华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科	7	9	2.0	2.0