反相高效液相色谱内标法检测球体培养猪肝细胞利多卡因代谢功能

• 作者: 徐新 陈钟
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肝,人工 肝细胞 细胞培养技术 利多卡因
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 短篇论著
• 页码范围: 1377-1379
• 页数: 3页
• 分类号: R318.14
• 字数: 2852字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2006.12.026

摘要

目的:采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)内标法测定培养的猪肝细胞利多卡因浓度,以初步评价球体培养的猪肝细胞利多卡因代谢功能. 方法:采用原位胶原酶循环灌注法分离猪肝细胞,以1×107/ml密度接种至无血清培养基中,分别采用球体培养法和贴壁培养法培养0～7 d.分别于培养0、1、3、5、7 d在培养液中加入利多卡因100 ng/ml.用锥虫蓝拒染试验检测培养肝细胞的活率;在倒置显微镜下观察肝细胞形态;采用RP-HPLC内标法测定培养24 h后上清液中利多卡因浓度. 结果:培养3～7 d,球体培养组肝细胞活率高于贴壁培养组(P＜0.05).球体培养24 h后80%～90%的肝细胞形成多细胞球形聚集体.培养1～7 d,球体培养组利多卡因浓度低于贴壁培养组(P＜0.05);两组在培养第3天时利多卡因浓度最低. 结论:RP-HPLC内标法可用于测定培养的猪肝细胞利多卡因浓度,方法灵敏、准确、快速.高密度下球体培养猪肝细胞利多卡因代谢功能高于贴壁培养,以培养第3天为最强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈钟	南通大学附属医院肝胆外科	90	363	10.0	14.0
2	徐新	南通大学附属医院药剂科	23	104	6.0	10.0