重组人成纤维细胞生长因子-20的原核表达、生物学活性鉴定及抗血清制备

• 作者: 姜治国 康晓燕 李瑾 殷正丰 罗祥基 钱海华
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 成纤维细胞生长因子-20 原核表达 免疫血清
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 950-952
• 页数: 3页
• 分类号: R349.6
• 字数: 2954字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2006.09.006

摘要

目的:表达具有生物学活性的重组人成纤维细胞生长因子-20(rhFGF-20),并制备rhFGF-20抗血清.方法:应用RT-PCR从人前列腺组织总RNA中扩增FGF-20的cDNA,将其克隆到pET-24a中,在大肠杆菌中诱导表达,经NTA-Ni2+-琼脂糖亲和层析纯化,应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、细胞增殖试验进行分析鉴定,并免疫新西兰雄性白兔制备多克隆抗体,免疫双扩散法测定抗体效价.结果:构建的pET-24a-FGF-20能在大肠杆菌中高表达;诱导表达的rhFGF-20蛋白主要存在于包含体中,经包含体溶解、Ni2+-NTA His-Bind Resins亲和层析后,纯化产物呈单一条带;细胞增殖试验显示其能促进成纤维细胞生长,并具有剂量依赖性(浓度为50～5 000 ng/ml);制备的抗血清效价为1∶32,可与hFGF-20产生免疫反应.结论:大肠杆菌表达的rhFGF-20蛋白具有刺激成纤维细胞增殖的活性,制备的抗血清具有特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱海华	第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室	18	135	8.0	11.0
2	康晓燕	第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室	18	104	6.0	9.0
3	殷正丰	第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室	66	456	12.0	18.0
4	李瑾	第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室	14	132	5.0	11.0
5	姜治国	第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室	9	38	4.0	6.0
6	罗祥基	第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室	19	230	9.0	15.0