人源性肺癌噬菌体展示单链抗体库的构建

• 作者: 吴逸明 张慧珍 杨继要 范清堂 许东
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 肺肿瘤 抗体,肿瘤 人体 单链抗体(scFv) 噬菌体展示
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 823-826
• 页数: 4页
• 分类号: Q503|R734.2
• 字数: 2448字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2006.09.007

摘要

目的:构建人源性肺癌噬菌体单链抗体库,为筛选肺癌相关抗原的抗体奠定基础.方法:提取肺癌转移淋巴结总RNA,用RT-PCR技术扩增人抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,在体外将VH和VL连接成单链抗体(ScFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB 5E中,电转化至感受态的大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体超感染,形成噬菌体单链抗体库,采用限制性内切酶鉴定其多样性.结果:从肺癌转移淋巴结中成功提取RNA,逆转录PCR扩增出入可变区基因,连接形成单链抗体,最终构建了库容为1.2×108的抗人肺癌单链抗体库.BstN Ⅰ酶切法证明构建的抗体库具有良好的多样性.结论:成功地构建了噬菌体展示的抗人肺癌单链抗体库,为进一步筛选肺癌相关蛋白的可溶性抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴逸明	郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室	201	1078	14.0	20.0
2	张慧珍	郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室	57	396	12.0	17.0
3	杨继要	郑州大学基础医学院组织与胚胎学教研室	38	138	7.0	9.0
4	许东	郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室	25	123	6.0	9.0
5	范清堂	郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室	27	106	6.0	8.0