可分泌表达人降钙素基因相关肽重组腺相关病毒体外转染培养的血管内皮细胞及其表达

• 作者: 孙建华 崔险峰 邢俊平 邱曙东
• 来源期刊: 中国男科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组腺相关病毒 降钙素基因相关肽 转染 血管内皮细胞
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: R373.9|Q786|Q492.4
• 字数: 2980字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0848.2006.01.006

摘要

目的观察可分泌表达人降钙素基因相关肽(human calcitonin gene-related peptide,hCGRP)重组腺相关病毒(rAAV)体外转染培养的血管内皮细胞(endothelial cells of vessel,ECV)及其作用,探讨其应用于血管性勃起功能障碍基因治疗的可行性.方法分别以可分泌表达hCGRP的重组腺相关病毒VssHGCMV-hCGRP、表达报告基因GFP中的重组腺相关病毒VssCMV-GFP和空病毒pssHGCMV体外转染培养的ECV细胞,采用斑点印迹试验检测培养基中的hCGRP,以放射免疫法检测转染细胞中的cAMP和cGMP水平,观察GFP和hCGRP的表达及其对ECV细胞的影响.结果腺相关病毒载体能有效地将外源基因hCGRP导入血管内皮细胞并稳定表达,VssHGCMV-hCGRP病毒组细胞中cAMP水平(45.74±3.45)nmol/L较pssHGCMV空病毒组(14.84±0.65)nmol/L和对照组(12.74±0.65)hmol/L明显高(P＜0.01),并可在实验组24h细胞培养液中检测到免疫反应性hCGRP.结论可分泌表达生物活性肽重组腺相关病毒基因转移系统可有效进行多肽类在血管内皮细胞过表达,并可选择性刺激该细胞中cAMP水平升高,提示hCGRP可作为血管性勃起功能障碍基因治疗的有效候选基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邢俊平	西安交通大学医学院第一附属医院泌尿外科	79	406	10.0	15.0
2	崔险峰	西安交通大学医学院第一附属医院泌尿外科	6	18	3.0	4.0
3	孙建华	西安交通大学医学院第一附属医院泌尿外科	7	44	4.0	6.0
4	邱曙东	西安交通大学医学院生殖医学研究中心	55	591	12.0	22.0