siRNA抑制HPV18 E6基因及其对HeLa细胞凋亡的影响

• 作者: 危敏 孙朝晖 张宝 郑文岭 马文丽
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: siRNA HeLa细胞 HPV18 E6基因 凋亡
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1112-1117
• 页数: 6页
• 分类号: R737.33
• 字数: 3292字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2006.10.014

摘要

目的 研究特异小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对宫颈癌HeLa细胞中人乳头瘤病毒(human pap-illomavirus,HPV)18型E6基因的抑制及其对细胞凋亡的影响.方法 针对 HPV18 E6基因设计siRNA序列,经PCR方法体外扩增,得到含有U6启动子以及siRNA序列的PCR产物,利用 Lipofectamine TM2000脂质体转染HeLa细胞,在U6启动子的作用下于细胞内转录siRNA.针对转染后不同时间点采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞活力,流式细胞仪PI染色法检测细胞凋亡率,RT-PCR测定HPV18 E6 mRNA变化.结果 转染siRNA后细胞活力受到显著抑制(P＜0.05),光镜下出现明显的凋亡形态,72 h的凋亡率达到55.8%.RT-PCR结果显示,细胞转染24、48和72 h后HPV18 E6 mRNA分别减少了57%、78%和40%,而siRNA阴性对照与未转染细胞相比差异不显著.结论 siRNA可特异有效的干扰宫颈癌HeLa细胞内HPV18 E6基因的表达,从而可诱导肿瘤细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马文丽	南方医科大学分子生物学研究所	275	1255	15.0	23.0
2	郑文岭		94	308	8.0	12.0
3	危敏	南方医科大学分子生物学研究所	28	74	5.0	6.0
4	张宝	南方医科大学分子生物学研究所	60	148	7.0	8.0
5	孙朝晖	南方医科大学分子生物学研究所	4	24	3.0	4.0