适合西兰花的ISSR反应体系的建立

• 作者: 李钧敏 金则新
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 西兰花 ISSR 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 园艺
• 页码范围: 79-81
• 页数: 3页
• 分类号: S635.903.6
• 字数: 3119字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-1302.2006.01.027

摘要

以西兰花基因组DNA为材料,对ISSR-PCR反应体系中各种影响因子如镁离子浓度、dNTP浓度、模板DNA含量、Taq DNA聚合酶量BSA浓度、引物用量、甘油浓度以及最适退火温度等进行了优化和筛选,建立了适合西兰花的ISSR反应体系:10 μl PCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris·HCl,pH值9.0,50 mmol/L KCl,0.1% Triton X-100),2.0 mmol/L MgCl2,0.75 U Taq酶,5 ng模板DNA,12 pmol引物,dATP、dCTP、dGTP、dTTP各0.2 mmol/L,4 mg/ml BSA,西兰花的最适退火温度为48.5 ℃.