shRNA沉默VEGF基因表达对大肠癌细胞生物学特性的影响

• 作者: 余佩武 刘伟 吕伟 张超 郝嘉 郝迎学
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 短发夹状RNA VEGF 增殖
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 447-450
• 页数: 4页
• 分类号: R394-33|R394.2|R735.34
• 字数: 3657字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.05.022

摘要

目的观察Pavu6+27-VEGF siRNA重组体在细胞体内表达的VEGF短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)对人大肠癌HCT116细胞株生物学特性的影响.方法将自行构建的表达短发夹状RNA的重组质粒转染到大肠癌HCT116细胞株中,以空质粒Pavu6+27转染为对照,经G418筛选出稳定表达shRNA细胞,行RT-PCR检测VEGF-mRNA表达的改变,Western blot检测VEGF蛋白表达,流式细胞技术分析细胞周期分布,MTT比色法检测细胞的生长抑制率.结果成功转染重组体的HCT116细胞中VEGF-mRNA表达明显下降,约降低为对照组的61.2%(P＜0.05).VEGF蛋白表达明显下降,光密度分析比较差异有显著性(P＜0.05).G0/G1期细胞比例增高,另一方面S期和G2/M期细胞比例降低,细胞的增殖指数明显降低,实验组细胞增殖指数为(25.63±4.54)%,对照组细胞的增殖指数为(31.90±2.19)%(P＜0.05).结论Pavu6+27-VEGF siRNA重组体在细胞内表达的短发夹状RNA能有效抑制人大肠癌细胞VEGF-mRNA和VEGF蛋白表达,细胞增殖能力减弱,为质粒介导的RNAi技术运用于大肠癌的基因治疗提供一定的实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余佩武	第三军医大学西南医院普通外科	226	1909	21.0	31.0
2	郝嘉	第三军医大学西南医院普通外科	83	391	9.0	16.0
3	刘伟	第三军医大学西南医院普通外科	39	187	8.0	11.0
4	张超	第三军医大学西南医院普通外科	113	709	14.0	21.0
5	吕伟	第三军医大学西南医院普通外科	19	95	6.0	9.0
6	郝迎学	第三军医大学西南医院普通外科	30	196	8.0	12.0