用根癌农杆菌介导法转化大豆萌动子叶节细胞

• 作者: 薛仁镐
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 大豆 根癌农杆菌 转化 萌动种子 子叶节
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1188-1192,后插3
• 页数: 6页
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0496-3490.2006.08.014

摘要

利用根癌农杆菌转化萌动大豆成熟子叶节获得了高频率的转基因大豆.从萌发12～16 h的大豆种子切取半片种子作为目标组织,对其子叶节组织进行伤处理后,接种于含有pGB载体的LBA4404农杆菌溶液.pGB载体含有除草剂(phosphinothricin, PPT)抗性基因bar和绿色荧光蛋白基因sgfp.将接种的外植体分别在含有3或5 mg/L PPT的芽诱导培养基、3 mg/L PPT的芽伸长培养基及2～4 mg/L PPT的根诱导培养基上进行了筛选.利用萌发5 d的外植体进行PPT浓度筛选的结果表明,芽诱导、芽伸长及根诱导阶段的PPT浓度分别为5、3及3 mg/L时,转化效率达到最大值,为5.3%.PCR和Southern杂交结果证实了外源基因稳定地整合在大豆基因组中.Northern杂交和GFP分析结果表明被整合的外源基因在大豆细胞中得到了稳定的表达.成熟植株对体外喷洒100 mg/L PPT溶液产生抗性.转化效率达8.9%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛仁镐	莱阳农学院生命科学学院	5	91	5.0	5.0