人bcl-xl转基因小鼠外源基因的复制及其传代稳定性

• 作者: Wang Fu-rong 张苏明 王芙蓉 肖文伍 袁慧 赵浩斌 郑新民 魏庆信
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠国转基因 基因 DNA复制
• 年，卷（期）: 2006,（30）
• 所属期刊栏目: 神经再生相关基础研究
• 页码范围: 184-186
• 页数: 3页
• 分类号: R742
• 字数: 2668字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.30.042

摘要

背景:近年的研究表明,在脑缺血再灌注损伤机制中,bcl-xl基因可能起着抗神经细胞凋亡的脑保护作用.目的:观察转bcl-xl基因小鼠外源基因的复制及传代稳定性问题.设计:以基因为观察对象.单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科和湖北省农科院畜牧兽医研究所.材料:实验于1999-10/2001-04在华中科技大学同济医学院附属同济医院完成.选取昆明种小鼠4只.方法:通过显微注射法建立转人bcl-xl基因小鼠,将PCR及Southern-blot检测整合阳性的小鼠与正常鼠交配并传代,然后检测子代小鼠外源基因的表达情况.作Southern-blot检测,结果证实第10,13,5,6号小鼠为整合阳性小鼠.以4只整合阳性小鼠作为首建者,分别与正常的昆明白小鼠交配繁殖传代,所生子代记为F1代,各系列的F1～F4代均采用阳性转基因小鼠与正常的昆明白小鼠交配繁殖传代方法,保持其杂合子形式.主要观察指标:检测外源基因的复制和传代的稳定性.结果:10号小鼠传代过程中外源基因PCR检测阳性率保持稳定,符合孟德尔遗传规律,表明外源基因能够稳定遗传.6号小鼠PCR阳性率呈轻微下降趋势,但仍能够保持相对稳定遗传.13号和5号小鼠PCR阳性率均呈明显的下降趋势,表明这2只小鼠存在外源基因遗传丢失现象.结论:应用基因组DNA做目的基因,可获得能够稳定遗传的转基因鼠系.