线粒体膜电位对缺氧人肺动脉平滑肌细胞内氧自由基的变化及细胞增殖的作用

• 作者: 张珍祥 徐永健 汪涛 胡红玲 赵建平
• 来源期刊: 中华结核和呼吸杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺动脉 肌,平滑 细胞低氧 线粒体 膜电位
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 727-730
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3401字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1001-0939.2006.11.003

摘要

目的 研究线粒体膜上ATP敏感钾通道(MitoKATP)的开放剂二氮嗪和线粒体膜电位在缺氧引起的人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)内氧自由基的变化及细胞增殖/凋亡失衡中的作用.方法 培养HPASMC并将所培养的细胞分为6组:正常对照组(A组);MitoKATP阻断剂5-羟基癸酸盐(5-HD)组(B组);MitoKATP开放剂二氮嗪组(C组);慢性缺氧组(D组);慢性缺氧+二氮嗪组(E组);慢性缺氧+5-HD组(F组),每组样本数均为6.利用激光共焦显微镜成像检测线粒体膜电位,荧光染色检测细胞内氧自由基含量,免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、c-fos及c-jun的蛋白表达和四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况.结果 C、D、E组细胞线粒体膜电位(以R123的荧光强度表示)分别为105±4、95±13、126±8,较A组(75±7)明显去极化(q值分别为5.474、3.659、9.213,P均＜0.05);C、D、E组细胞内氧自由基含量分别为3 045±126、3 116±34、3 236±31,与A组(2 772±49)比较差异有统计学意义(q值分别为6.882、7.448、16.289,P均＜0.05);C、D、E组细胞增殖活性[以MTT法检测出的A值表示]分别为0.305±0.022、0.328±0.078、0.440±0.023,与A组(0.237±0.013)比较差异有统计学意义(q值分别为2.993、 4.017、8.919,P均＜0.05),且E组线粒体膜电位、细胞内氧自由基含量、细胞增殖活性与D组比较差异有统计学意义(q值分别为5.554、8.841、4.902,P均＜0.05).F组线粒体膜电位、细胞内氧自由基含量、细胞增殖活性分别为71±4、2 863±132、0.264±0.045,与D组(95±13、3 116±34、0.328±0.078)比较差异有统计学意义(q值分别为4.367、5.907、2.832,P均＜0.05).结论 二氮嗪或缺氧能够通过开放HPASMC线粒体膜上ATP敏感的钾通道,引起线粒体膜电位去极化,增加细胞内氧自由基的含量,最终导致HPASMC的增殖/凋亡的失衡,从而促进了缺氧性肺动脉重塑过程.