低氧诱导因子在低氧中对人外周血内皮祖细胞分化的影响

• 作者: 姜萌 王彬尧 王长谦 黄定九
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 病理学与病理生理学 低氧诱导因子1α 氧分压降低 内皮祖细胞 内皮细胞 细胞扩增
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 382-386
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 4592字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2006.05.004

摘要

目的研究低氧诱导因子1α在体外氧化压降低环境中对人外周血内皮祖细胞向血管内皮细胞分化的影响.方法密度梯度离心法分离人外周血内皮祖细胞,电穿孔技术转染低氧诱导因子1α质粒,计算转染效率;逆转录聚合酶链反应测定常氧和低氧环境中低氧诱导因子1α、1β及其血管内皮生长因子mRNA在质粒转染前后表达变化.Western blot检测转染前后低氧诱导因子1α蛋白表达,流式细胞术测定细胞膜表面抗原决定簇、荧光报告蛋白空质粒或低氧诱导因子1α质粒转染组转后的组间差异,一氧化氮酶法鉴定各组血管内皮生长因子依赖性一氧化氮的释放活性,镜下观察细胞形态及分化程度.结果质粒转染效率约20%;转染20 h,低氧诱导因子1α mRNA在常氧中及低氧中均有表达,表达程度与氧浓度无关(P>0.05);低氧及转染低氧诱导因子1α基因诱导血管内皮生长因子表达上调(P<0.05);1β亚基表达在各组中无明显差异(P>0.05).1%低氧3 h低氧诱导因子1α蛋白开始表达,6 h时表达成倍增加,12 h达高峰,24 h表达回到基线水平.流式细胞仪检测发现,转染后常氧下孵育3天,转pEGFP组CD31+细胞占总细胞数40.2%±4.3%,低氧诱导因子1α组占53.8%±3.7%(P<0.05);孵育10天后转pEGFP组CD31+细胞占51.8%±3.5%,低氧诱导因子1α组占66.2%±6.6%(P<0.05).转染后低氧下孵育3天,转pEGFP组CD31+细胞占总细胞数46.8%±3.5%,低氧诱导因子1α组占60.2%±5.0%(P<0.05);孵育10天,转pEGFP组CD31+细胞占59.0%±3.5%,低氧诱导因子1α组占76.1%±1.9%(P<0.05).低氧较常氧易促一氧化氮释放,转染低氧诱导因子1α基因使一氧化氮释放增加,释放含量与血管内皮生长因子刺激量成正比,随刺激时间延长而增加(P<0.01).低氧环境加快内皮祖细胞向内皮细胞分化、扩增,低氧诱导因子1α质粒转染同样促进内皮祖细胞分化.结论低氧诱导因子1α质粒能有效地应用于转录水平进行基因干扰治疗,并在低氧环境中增效,有助于促进内皮祖细胞向内皮细胞分化,为进一步诱导体内血管新生、治疗缺血性心脏病提供了更广阔的治疗选择.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄定九	上海第二医科大学附属仁济医院心内科	66	513	12.0	20.0
2	王长谦	上海第二医科大学附属仁济医院心内科	56	375	11.0	16.0
3	王彬尧	上海第二医科大学附属仁济医院心内科	75	452	13.0	17.0
4	姜萌	上海第二医科大学附属仁济医院心内科	3	15	2.0	3.0