人破骨细胞分化因子基因启动子报告载体的构建

• 作者: 刘瑞 杨宇虹 王宝利 郑纺
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 破骨细胞分化因子 启动区(遗传学) 遗传载体 人
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 361-363,后插1
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2006.06.001

摘要

目的:构建能够报告人破骨细胞分化因子(ODF)基因启动子活性的表达载体.方法:以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有ODF基因启动子的2段序列(-2433～-1 243 bp和-1 262～+100 bp),通过T-A克隆将这2个序列片段分别连接到pGEM(R)-T Easy克隆载体上.利用特定的限制性内切酶位点,将这2个序列片段酶切后进行正确拼接并定向克隆到不含启动子的pEGFP-1报告基因载体上.将该重组质粒pEGFP-1-ODF瞬时转染成骨细胞系UMR106,检测其能否在ODF基因启动子(-2 358～+100 bp)的调控下表达报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP).结果:pEGFP-1-ODF经酶切鉴定和序列分析证实与设计完全一致.细胞瞬时转染结果表明,pEGFP-1-ODF转染的UMR106能表达EGFP.结论:人ODF基因启动子报告载体的成功构建,为进一步研究ODF基因表达转录水平的调控机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨宇虹	天津医科大学生化教研室	16	100	6.0	9.0
2	王宝利	天津医科大学代谢病医院内分泌研究所卫生部激素与发育重点实验室	43	222	9.0	13.0
3	郑纺	天津医科大学代谢病医院内分泌研究所卫生部激素与发育重点实验室	5	3	1.0	1.0
4	刘瑞	天津医科大学代谢病医院内分泌研究所卫生部激素与发育重点实验室	5	13	2.0	3.0