三种方法纯化相思子毒素单抗的比较

• 作者: 刘国文 姜涛 徐慧娟 李小兵 王哲 罗胜军 谢光洪 马惠海 高英杰 魏东
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 相思子毒素 单克隆抗体 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 72-75
• 页数: 4页
• 分类号: S859.87
• 字数: 3180字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2006.11.020

摘要

采用不同的方法纯化相思子毒素单抗,寻求一种效果好、操作简便的纯化方法.采用硫酸铵沉淀法、辛酸-硫酸铵法和硫酸铵-蛋白A亲和层析法三种方法分离纯化相思子毒素单抗,并采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS- PAGE)、BCA蛋白检测试剂盒(BCA Protein Assay Kit)和双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)对纯化产物进行相对分子质量、浓度、纯度、回收率及免疫活性的鉴定.结果表明,纯化后单抗的回收率以硫酸铵沉淀法及辛酸-硫酸铵法较高,硫酸铵-蛋白A亲和层析法较低;产物纯度以硫酸铵-蛋白A亲和层析法和辛酸-硫酸铵法较高,硫酸铵沉淀法较差;不同方法纯化后的单抗活性未见降低.